本文標題："后固定一般用鋨酸超薄切片經(jīng)鈾一鉛復染后電鏡觀察"

發(fā)布者：YIYI ------ 分類: 站內(nèi)動態(tài) ------ 人瀏覽過 -----時間：2016-1-23 13:27:16

后固定一般用鋨酸超薄切片經(jīng)鈾一鉛復染后電鏡觀察

    后固定一般用鋨酸，超薄切片經(jīng)鈾一鉛復染后電鏡觀察。
但復染除有模糊重要細節(jié)的危險外，復染溶液對細胞化學反應
產(chǎn)物有劇烈的作用。曾在腎上膝位質(zhì)進行乙酰膽堿醋腳反應，
一張切片不復染作對照，一張切片用枸櫞酸鉛室溫染5min，結(jié)
果每個軸突周邊的大部分有增強的AChE染色。
    一張切片用醋酸雙氧鈾酒精溶液60℃染10min，大部分AChE
反應產(chǎn)物從袖突上脫掉。所以，電鏡酶細胞化學應避免進行復染，
只有確證復染不干擾其結(jié)果的情況下，才采用復染以提高反差。
    不復染的切片反差太弱，電鏡照片結(jié)構模糊。用亞鐵氰化
鉀還原鋨酸代替一般鋨酸進行后固定，可獲得較好的反差，避免
了復染。后固定時配制3%亞鐵氰化鉀水溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)和2%鋨酸
水溶液(常規(guī)電鏡保存液)，兩液等量混合，立即用于后固定。4℃
或室溫下固定時間在lh以內(nèi)。時間太長，有的反應產(chǎn)物也會被溶
解。后固定后要充分漂洗，再保存于二甲腫酸鈉緩沖液中，4℃可
保存幾天再包埋。

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